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關(guān)于細(xì)胞分離試劑盒

更新時(shí)間:2023-12-22      點(diǎn)擊次數(shù):514

過(guò)研究體內(nèi)組織來(lái)源的細(xì)胞,可以對(duì)細(xì)胞的生物學(xué)和功能進(jìn)行有效的預(yù)測(cè),但這需要對(duì)靶標(biāo)細(xì)胞群體進(jìn)行分離,否則生物學(xué)的復(fù)雜性可能導(dǎo)致結(jié)果混淆。為了對(duì)細(xì)胞表型進(jìn)行研究,目前已開(kāi)發(fā)出多種基于明確特征對(duì)細(xì)胞群體進(jìn)行分離的不同方法。對(duì)細(xì)胞群體進(jìn)行分離不僅有助于生物學(xué)研究,而且也能促進(jìn)臨床上的診斷性檢測(cè)。有效的分離方法應(yīng)具備出色的產(chǎn)量、純度和活力。可通過(guò)正向選擇(通常采用結(jié)合細(xì)胞特異性標(biāo)志物的抗體)或負(fù)向選擇(基于生物物理特性將不需要的細(xì)胞進(jìn)行去除從而富集靶標(biāo)細(xì)胞群體)來(lái)實(shí)現(xiàn)對(duì)靶標(biāo)細(xì)胞群體的富集或純化。

長(zhǎng)期以來(lái),將細(xì)胞分離成各種亞細(xì)胞成分一直都是細(xì)胞生物學(xué)研究的基礎(chǔ)。亞細(xì)胞分離技術(shù)已廣泛用于研究細(xì)胞器和亞細(xì)胞區(qū)室的結(jié)構(gòu)和功能,以及了解生物分子的定位、加工和運(yùn)輸。大多數(shù)分離技術(shù)都旨在獲得處于功能性狀態(tài)的細(xì)胞器和細(xì)胞大分子,此時(shí)它們?nèi)员A羝涔逃械纳匦浴_@通常通過(guò)采用溫和的機(jī)械方法或使用溫和的去污劑進(jìn)行細(xì)胞裂解,然后通過(guò)差異離心將細(xì)胞成分進(jìn)行分離來(lái)實(shí)現(xiàn)。

基于表型的細(xì)胞分離

為了評(píng)估脂質(zhì)裂解、細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、內(nèi)分泌功能和代謝活性,可以使用前脂肪細(xì)胞來(lái)研究脂肪形成和分化后的過(guò)程。

我們的前脂肪細(xì)胞分離試劑盒包含了從脂肪組織中分離基質(zhì)血管細(xì)胞成分所需的工具和試劑。所得到的基質(zhì)血管成分將會(huì)培養(yǎng)在前脂肪細(xì)胞所粘附的組織培養(yǎng)板上。前脂肪細(xì)胞保留了增殖以及在使用誘導(dǎo)分化成分處理時(shí)可分化為脂肪細(xì)胞的能力。

細(xì)胞器和亞細(xì)胞復(fù)合物的分離

亞細(xì)胞成分的衍生可促進(jìn)對(duì)細(xì)胞器功能的理解,并催生新的生物技術(shù)。例如,從哺乳動(dòng)物細(xì)胞中分離出的細(xì)胞核可后續(xù)用于合成內(nèi)源性RNA初級(jí)轉(zhuǎn)錄本。我們已開(kāi)發(fā)出了高產(chǎn)量的Nuclei EZ Prep試劑盒,可快速分離出大多數(shù)哺乳動(dòng)物的細(xì)胞核。

為了檢測(cè)線粒體的完整性和膜電位,我們的線粒體染色試劑盒使用了JC-1染料,其會(huì)集中在線粒體基質(zhì)中并形成紅色熒光團(tuán)。細(xì)胞凋亡等能夠消耗線粒體膜電位的事件會(huì)阻止JC-1染料在線粒體中的積累,因此可利用熒光顯微鏡來(lái)區(qū)分具有活力的線粒體和受損的線粒體。

另外,也可分離非細(xì)胞器的亞細(xì)胞復(fù)合物(如蛋白酶體),將其用于蛋白水解測(cè)定。我們使用含有一段GST融合蛋白的親和基質(zhì)微珠進(jìn)行分離,該融合蛋白具有可與GST-瓊脂糖結(jié)合的泛素樣結(jié)構(gòu)域。

細(xì)胞骨架富集

傳統(tǒng)上,研究與肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架相關(guān)的蛋白都很棘手,因?yàn)榧?xì)胞骨架元素不溶于類似于Triton X-100的去污劑。Millipore ProteoExtract細(xì)胞骨架富集和分離試劑盒帶有細(xì)胞骨架純化緩沖液,能夠保留粘著斑和肌動(dòng)蛋白相關(guān)蛋白并同時(shí)從細(xì)胞中去除可溶性細(xì)胞質(zhì)和核蛋白。該方法可增強(qiáng)檢測(cè)并研究低豐度肌動(dòng)蛋白相關(guān)蛋白的能力,而這些蛋白在使用Western blotting分析全細(xì)胞裂解物時(shí)通常會(huì)被掩蓋掉。



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